PCR實(shí)驗(yàn)室又被稱為遺傳基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室，特點(diǎn)是能把少量的DNA大幅上升，PCR是生物學(xué)研究與實(shí)驗(yàn)的基本方式，廣泛用于分子生物學(xué)各行各業(yè)。比如：hlv、乙肝、禽病疫、癌基因的檢查和確診，DNA指紋、個(gè)體識(shí)別、dna鑒定及法醫(yī)物證、動(dòng)植物檢疫，小動(dòng)物以及衍生品檢驗(yàn)，飼料原料、護(hù)膚品、食品類衛(wèi)生檢測(cè)，轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因食品微生物檢驗(yàn)等。
本文從PCR實(shí)驗(yàn)室合理布局、工作中區(qū)域的重要功能和設(shè)備配置、實(shí)驗(yàn)室的排風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制、裝飾裝修材料規(guī)定及其它常見問題來講解。
一、PCR實(shí)驗(yàn)室合理布局
正常情況下分成四個(gè)區(qū)域：試劑提前準(zhǔn)備區(qū)、試品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增物質(zhì)分析區(qū)。
PCR實(shí)驗(yàn)室正常情況下為試劑提前準(zhǔn)備區(qū)、試品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增物質(zhì)分析區(qū)四個(gè)獨(dú)立的工作中區(qū)域并配有專用型過道，各工作中區(qū)域需設(shè)緩沖間，工作區(qū)域與緩沖間宜組裝連鎖加盟設(shè)備。不一樣的功能工作區(qū)域應(yīng)該是隔開獨(dú)立，各工作區(qū)域有明顯標(biāo)示，不可以直達(dá)，假如緊密結(jié)合，需組裝物件傳遞窗。
PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)置并不是一成不變的，以下這些狀況必須表明：
1.假如樣版在擴(kuò)增前需要破碎解決，就需要增加一個(gè)區(qū)域用以樣品破碎。
2.如果使用實(shí)時(shí)熒光PCR法，則擴(kuò)增區(qū)和分析區(qū)能夠合并為一個(gè)區(qū)。
3.如果使用全自動(dòng)PCR檢測(cè)儀，則樣本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和分析區(qū)能夠合并為一個(gè)區(qū)。
前兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)，擴(kuò)增后區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)苛分離。實(shí)驗(yàn)材料、試劑、記錄紙、筆、清理材料及，需要從擴(kuò)增后區(qū)流入擴(kuò)增后區(qū)，也就是從試劑提前準(zhǔn)備區(qū)、試品制備區(qū)到擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增物質(zhì)分析區(qū)，不可反向流動(dòng)性。實(shí)驗(yàn)室的氣旋也應(yīng)從擴(kuò)增后區(qū)流入擴(kuò)增后區(qū)，不可反向流動(dòng)性。各工作區(qū)域頂端應(yīng)組裝紫外線燈，紫外線燈的光波長為254nm，每20㎡一支40W的紫外線燈。
二、實(shí)驗(yàn)室各個(gè)區(qū)作用及關(guān)鍵設(shè)備
正常情況下的四大區(qū)域留意正壓力負(fù)壓力的控制。
1.試劑提前準(zhǔn)備區(qū)：
關(guān)鍵開展試劑的制備、分開包裝和主反應(yīng)混合物的制備。試劑和用以試品制作出來的原材料應(yīng)立即運(yùn)輸至該區(qū)域，不可通過其他區(qū)域。試劑原料務(wù)必存儲(chǔ)在本區(qū)內(nèi)，并且在本區(qū)內(nèi)制備成所需要的試劑。本區(qū)關(guān)鍵設(shè)備有天平秤、電冰箱、離心脫水機(jī)、加樣器、震蕩器等。
針對(duì)氣旋的壓力操縱，本區(qū)并沒高的要求。
2.試品制備區(qū)：
關(guān)鍵開展樣品儲(chǔ)存、核苷酸(RNA、DNA)獲取、存儲(chǔ)以及添加至擴(kuò)增反應(yīng)管和檢測(cè)DNA的生成。本區(qū)關(guān)鍵設(shè)備有電冰箱、超凈工作臺(tái)、離心脫水機(jī)、加樣器、震蕩器、恒溫水浴槽等。
本區(qū)的滲透壓力要求為：相較于相鄰區(qū)域?yàn)檎龎毫?，以防止從相鄰區(qū)進(jìn)到本區(qū)的大氣氣溶膠環(huán)境污染。
3.擴(kuò)增區(qū)：
該區(qū)域功能的是DNA擴(kuò)增和擴(kuò)增精彩片段的測(cè)量。除此之外，反映混合物(來源于試劑存儲(chǔ)和制備區(qū))制備成反映混合物和已制備的DNA模版(來源于樣本制備區(qū))的加持等還可在本區(qū)中進(jìn)行。針對(duì)氣旋的壓力操縱，相較于相鄰區(qū)域?yàn)樨?fù)壓力，以防止大氣氣溶膠從本區(qū)漏出來。為防止大氣氣溶膠所引起的環(huán)境污染，應(yīng)盡量避免在本區(qū)內(nèi)不必要行走。某些實(shí)際操作亦或者樣等需在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行。
該區(qū)域的機(jī)器通常是核苷酸擴(kuò)增熱力循環(huán)儀、加樣器、超凈工作臺(tái)等。在其中熱力循環(huán)儀的開關(guān)電源應(yīng)專用型，并配置一個(gè)可調(diào)穩(wěn)壓電源或UPS，以避免因?yàn)楣ぷ麟妷旱淖兓瘜?duì)擴(kuò)增測(cè)量影響的關(guān)鍵開展DNA擴(kuò)增。
本區(qū)的滲透壓力要求為：相較于相鄰區(qū)域?yàn)樨?fù)壓力，以防止大氣氣溶膠從本區(qū)漏出來。
4.擴(kuò)增物質(zhì)分析區(qū)：
擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)量。本區(qū)關(guān)鍵設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和沙浴箱等。
本區(qū)的壓力差的要求為：相較于相鄰區(qū)域?yàn)樨?fù)壓力，以防止擴(kuò)增物質(zhì)從本區(qū)蔓延至其他區(qū)域。
三、PCR實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制
四大區(qū)域應(yīng)產(chǎn)生單邊流線型、應(yīng)采用全送全排。
各區(qū)域中間需具備單邊的試驗(yàn)加工工藝流、貨運(yùn)物流、人流量與氣旋，產(chǎn)生單邊步驟保護(hù)的天然屏障，防止試驗(yàn)間的互相影響，避免大氣氣溶膠蔓延對(duì)實(shí)驗(yàn)步驟導(dǎo)致環(huán)境污染。
PCR實(shí)驗(yàn)室并沒嚴(yán)格凈化處理規(guī)定，可是為防止每個(gè)試驗(yàn)區(qū)域交叉污染的概率，應(yīng)采用全送全排的自然通風(fēng)方式，嚴(yán)格把控送、排風(fēng)系統(tǒng)比例以確保各試驗(yàn)區(qū)工作壓力規(guī)定。
此外，PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)一般有超凈工作臺(tái)、通風(fēng)櫥等生產(chǎn)線設(shè)備，這種機(jī)器設(shè)備風(fēng)量大而使用時(shí)長有間隔性，并不和空調(diào)機(jī)組使用時(shí)間一致，這就使得有這些機(jī)器設(shè)備房間在設(shè)備起停的時(shí)候特別非常容易過壓，本來正常滲透壓力一下子就破壞。這便是PCR實(shí)驗(yàn)室空調(diào)機(jī)組定制的難題所屬。
四、PCR實(shí)驗(yàn)室裝修設(shè)計(jì)
原材料規(guī)定：實(shí)驗(yàn)室排架結(jié)構(gòu)應(yīng)堅(jiān)固、密封性好。全部陽角線應(yīng)采用弧形銜接，墻面內(nèi)腔光滑、不積灰、抗腐蝕、易清潔消毒。路面應(yīng)用PVC卷材或環(huán)氧樹脂膠自流坪，原材料應(yīng)達(dá)到無間隙、沒有滲漏、光滑、抗腐蝕的需求。
五、PCR實(shí)驗(yàn)室常見問題
試品制備區(qū)室內(nèi)空間會(huì)大些：
1.好多個(gè)區(qū)域大小設(shè)定狀況，試劑提前準(zhǔn)備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增物質(zhì)分析區(qū)，室內(nèi)空間能夠相對(duì)性小一些，試品制備區(qū)域置放超凈工作臺(tái)和低溫箱，室內(nèi)空間應(yīng)大一些。
2.試劑提前準(zhǔn)備區(qū)、試品制備區(qū)設(shè)緊急洗眼器，以確保作業(yè)人員的安全性。
3.PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格凈化處理規(guī)定，也可以根據(jù)應(yīng)用情況和資金投入挑選。
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